
Nebbad博士
APHP 亨利·蒙多医院
法国克雷泰。

地点: 法国克雷泰。
仪器使用: DiluFlow Pro,BagFilter,BagMixer 400 S,easySpiral Dilute
微生物是指生活在特定环境中的微生物:细菌、病毒、寄生虫和非致病真菌(称为共生菌)—的集合。
人体内有不同的微生物:皮肤、口腔、阴道、肺部...... 肠道微生物是其中 "人口 "最多的地方,可容纳 1012 到 1014 种微生物。
肠道微生物对我们健康的作用已被越来越多的人了解和认识。我们现在知道,它在消化、新陈代谢、免疫和神经功能方面发挥着作用。因此,肠道微生物菌群失调,即肠道微生物菌群的质量和/或功能改变,是解释某些疾病的重要线索,尤其是那些潜伏着的会引起自身免疫或炎症机制的疾病。
Nebbad 博士和她的团队使用 Interscience 产品生产注射器或胶囊形式的粪便微生物菌群悬浮液,用于粪便微生物移植 (FMT),作为复发性艰难梭菌感染常规治疗的一部分,成功率高达 80%。
这一切都始于健康人的粪便捐献,其选择符合特定的标准,目的是尽可能避免传染源的传播。如今,捐献者寥寥无几,因为很少有人知道粪便捐献,而且根据 ANSM 的建议,被选中的捐献者必须符合捐献条件。
粪便首先称重并用重量稀释器 DiluFlow 直接稀释到 BagFilter 采样袋中,然后在拍打式均质器 BagMixer 中完成均质。BagFilter 内置的侧边过滤膜可在均质过程中直接过滤粪便,从而去除细胞碎片和未消化的食物纤维。
回收的滤液经离心后,注射器保存在 10% 甘油溶液中,胶囊剂保存在 80% 甘油溶液中。
采用螺旋计数技术(ISO7218标准化技术)对制剂进行细菌计数。easySpiral Dilute 自动从含有氯化钠和甘油的粪便悬浮液中进行 1/10 的连续稀释,直至得到 10-5 的溶液。然后,自动接种仪通过螺旋技术(可在同一培养皿上获得 4 个对数的稀释液)在不同的特定培养基上进行接种。每种培养基均重复进行,以确保重复性。
“ 我们需要节省时间并降低交叉感染的风险。„
“ 我的微生物学专业知识让我能够证明 Interscience 产品的安全性和卫生性。我们正在接近最高安全标准。„
“与旧的制备方法相比,Interscience的产品有了明显的改进。例如,样品的均质是用搅拌机完成的,每次操作后都必须清洗,这是交叉污染的主要来源。现在,每个样品都使用经过射线消毒的BagFilter均质袋在DiluFlow上进行稀释,然后由 BagMixer 自动进行均质。这些设备不与样品直接接触,且体积小巧,可在层流罩或安全柜中使用,从而使捐赠物尽可能安全,并保护操作人员的安全。此外,使用 BagFilter均质袋,不需要再人工过滤样品,我们直接在均质袋中移取滤液。这就减少了操作步骤以及与样品接触的耗材数量。
因此,从卫生和安全的角度来看,这种方法更快、更安全。至于细菌计数,使用 easySpiral就更方便了,因为它能接种 9 个稀释对数,可以直接获得稀释效果优秀的培养皿。这为我们节省了时间,并通过双重验证,使我们能够获得更可靠、更可重复的结果。„
“ 以前,样品的均质是在搅拌机中完成的,每次操作后我们都要清洗搅拌机,这是交叉污染的主要来源。„ Nebbad博士
“Intersience的产品让我们对制剂的细菌鉴定非常满意,因为我们的工作是重复的,而这些设备的性能具有很高的可重复性。此外,使用带有 BagClip 密封夹的袋子可以保持良好的厌氧条件,这对肠道细菌的培养至关重要。Interscience的产品体积小巧,可以在层流罩或生物安全柜中使用,降低了交叉污染风险。 „
“安全、方便、耐用。„
供体粪便和 FMT 制剂的细菌定量分析
• 每天分析次数:取决于捐赠率
• 稀释模式:DiluFlow 自动模式
• 稀释倍数:1:4 (v/v)
• 微生物:肠道微生物中可培养的兼性好养厌氧菌群
• 培养基:TSA、Drigalski、Schaedler KV (5% 羊血)、 Bifidobacterium、LBS、Colombia (5% 马血)
• 菌落计数: 手动